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Waters e2695 HPLC培训 2017年12月13日,我们参加了Waters公司举办的为期三天的高效液相色谱知识的培训班,主要对HPLC原理及Waters公司Alliance系统硬件和软件方面进行了系统的学习,并且针对e2695的日常使用和维护保养进行了理论和实操的培训学习,对于在QC岗位利用HPLC更好的进行检验操作有不小的裨益。 液相检测方法的起源以及发展史是在短暂的几十年之内发展到现如今完整齐备的一套系统,虽然不同的仪器厂家对于自己的产品各有不同的侧重,但基本原理都是遵循化合物极性之间相互物理作用产生分离待测物的效果。在种类繁多的色谱法中,我们配备的是技术比较完备的高效液相色谱,在日常检测中都是以反相色谱为主。高效液相色谱仪的检测流程是通过泵吸取流动相,经过进样器搭载样品通过色谱柱,之后到达检测器对已分离的化合物进行检测以及数据处理,最终输出为废液。 Waters的Allince系统是很典型的一款高效液相系统,2695分离系统集成了在流动相到达检测器之前的所有流程设备,在流动相离开色谱柱之后连接以不同的检测器,实现不同的化合物检测定量。通过培训学到了很多细节的东西,比如用丙酮测死时间、死体积;做纯度紫外吸收最多不宜超过1AU;由于2695进样系统的原因,进样结束最后需要加一针空白。 在周边设备--耗材的选择上也是收获不少。Waters公司做过相关测试,在关于使用滤膜的问题上,不建议使用国产尼龙膜,滤膜的使用不当会造成滤膜溶解随流动相到达色谱柱,堵塞筛板。内衬管的选用一般用户会选择一次性的塑料内衬管,如果选用玻璃内纯管,则要进行一系列按流程仔细的清洗,以免造成残留影响下一次使用。洗针液的配制选用上面,原则上要求对样品的溶解性好,可以与流动相互溶。 不同检测器也有不同的注意事项。我们实验室配备了三台检测器:紫外检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器。紫外检测器最核心的设备是灯组件,所以紫外检测器的使用及维护都是围绕氘灯的。因其寿命有限,所以在系统平衡的时候先不开灯,待进样前半个小时开灯。日常使用也应避免频繁的开关灯操作。紫外检测池相对来说是不耐压的,所以在串联检测器的时候,应该将紫外检测器串联在系统最后面,以免过高的压力损坏检测池。示差检测器不能与多通道通用,所以要事先将流动相混合均匀过滤待用,示差对于温度非常敏感,温度的变化会因引起基线的波动,响应不准确,因此在使用示差检测器时,对于温度的控制要非常注意。蒸发光散射检测器要注意:“开机气电水,关机水电气”。如果操作失误会造成流动相在飘移管中的积聚,对检测器带来严重的危害。飘移管温度的设置也要根据实际情况设置出合理的参数。还要注意,磷酸盐等物质是不能够通过2424检测器的。 相对于模块化的硬件体系,软件也是功能强大。Empower3软件是不依赖于操作系统的,在装机完成后,单机版计算机ip地址为唯一的192.168.0.1,不可改变,计算机名称也不能更改,否则会引起液相系统与计算机连接的问题。Empower3软件提供了强大的合规性设置,在软件的操作界面可以设置不同的人员操作权限,在属性设置里面,管理员可以配备不同的操作权限给不同的权限分组,而且软件提供完整的审计追踪,保证了在整个软件的使用过程中记录每一条主动与被动操作事件,对于追溯问题提供了极大的便利。 通过本次培训学习,让我对2695及Empower3的认识更加深入了一个层次,解决了很多平时很多困扰我的小问题,在以后的使用和维护保养中,我会利用本次所学的知识,更加熟练软硬件的操作,争取越来越少的问题,越来越高效率的样品检测。 |