示差检测器基使用注意事项

    示差折光检测器是一种通用型检测器，连续检测样品流路与参比流路间液体折光指数差值的检测器，是根据折射原理设计的。这个检测器的优点是，通用性很广，可以说所有液相色谱能用的检测器里面通用性最广的检测器，所有的东西只要能进液相的，基本都可以被它检测；但是它的缺点也是很明显的，主要是灵敏度及其低下，检出/定量限通常都要在mg/mL浓度级别，比起大家喜闻乐见的紫外类检测器要差上几个数量级；另外一个致命的缺点只能单通道走流动相，更不能用梯度方法。另外，稍不注意，走出来的图谱五花八门。

     在实际应用过程中注意事项有哪些呢？

1压力脉动：液相泵的输液脉动会使大部分的检测器（紫外，荧光，示差）产生一定的基线噪音，但是通常这种影响不会很致命，我们只要观察液相色谱系统的压力波动小于2%，那么压力波动产生的基线波动通常都是可以接受的；

2混合问题：虽然RID不会使用梯度方法，但还是不排除会有使用混合溶剂的情况，在这种情况下，泵的混合精度和效率会对RID的基线噪音有致命的影响，因为混合不均匀会导致每时每刻经过检测器的液体的折光率都在变化！因此，通常我们应该使用预混好并进行脱气过的流动相进行试验，并且只使用仪器的单一流路进行输液；

3脱气问题：虽然进行了溶液的预混，但是仍旧不能保证在实验过程中会有少量气体溶解在流动相中，而这些气体很可能以气泡的形式干扰RID的基线，气体和液体的折光率差异大的无法比较，所以在线脱气机对保持RID基线稳定非常重要；

4温度控制：温度控制对RID基线噪音的影响，非常非常大，温度的控制涉及到柱温，检测器温度和环境温度

1）柱温：对于常规的分析，控制柱温有助于得到稳定的保留时间；对于使用RID的方法，还有一个额外的用处—得到更平稳的基线，流动相从色谱柱流入检测器的时候，对于检测器内的温度是有改变的（色谱柱温度和检测器温度设置不同的时候），稳定的控温可以保证这种对于检测器温度变化的影响是一致的，可以说是个“系统误差”，但这本身不减小噪音，只能让噪音水平维持在一个稳定范围上，要减小噪音，就要设置柱温箱的温度让它和检测器的温度尽量接近，以尽可能的减小由于不同温度流动相进入检测器产生的噪音。有些分析方法使用到一些特殊的色谱柱，需要在较高的温度下使用（80摄氏度以上），这个时候使用柱温箱的柱后降温功能就非常重要了，因为示差检测器通常不能维持这么高的工作温度，如果柱温箱不具备降温功能，或者色谱柱长度太大，降温功能会造成色谱柱温度不均匀的时候，可以考虑使用一根比较长的不锈钢管线连接色谱柱出口和检测器并使它尽可能多的暴露在室温下，以充分冷却过热的流动相；

2)：检测器温度，大部分的示差检测器是带有控温功能的，用于控制检测器内部的温度保持稳定以减小由于温度变化造成的基线噪音，比较高级的RID的温度是可调的，通常我们建议把这个温度设置在比室温高5度的温度，以保证控制的稳定性，另外色谱柱的出口温度也应该尽量接近这个温度。

3)：环境温度，通常环境温度不会导致RID的基线噪音变大，但是，会导致基线的漂移，因为环境温度不会剧烈快速的上下波动，而且由于仪器的控温功能，也能抵消绝大部分的剧烈的温度变化，但是如果仪器处在一个温度会缓慢变化的地方，由于控温功能是有一定滞后的，这个时候就会体现出基线漂移的问题。比如，仪器放在空调正对的地方，阳光充足的窗边，暖气附近，都可能到这这种不正常的漂移，应当尽量避免这种“风水”问题...

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4系统冲洗：通常RID的系统冲洗平衡是个很好使的过程，要保证流路中流动相的完全替换，仪器环境温度的完全稳定，需要几个小时的时间，在RID内，有两个流通池，一个叫做检测池，另一个叫做参比池，顾名思义，检测池就是用来检测信号的，参比池的作用是实时比对检测池中折光率的变化，一旦检测池中的折光信号与参比吃中不同，检测器就会记录出色谱峰，就好象是一台天平，参比池中放的是标准砝码，一旦检测池中的东西与参比池中不同，天平就会倾斜，所以，对于参比池的冲洗是至关重要的，一旦开始实验，参比池中的流动相将不再流动，所以冲洗系统要保证参比池中的流动相与流路中的流动相完全一致，所以我们在配好流动相后，通常要先对参比池进行长时间的冲洗，这个过程通常会持续1，2个小时甚至更长，之后切换流路到检测池，继续冲洗，直到基线噪音在合理水平以内，如果冲洗检测池很长时间也无法得到很好的基线，可以考虑继续冲洗参比池，所以，冲洗参比池除了耗费时间之外，对流动相的消耗也很大，有些厂商的设计考虑到这一点，在检测器上加了一个“循环阀”可以让冲洗参比池的流动相循环利用，如果仪器上没有这个功能，我们也可以自己把示差检测器的出口废液管插回到溶剂瓶里手动循环。如果经过几个小时冲洗仍旧不能得到良好的基线，就要考虑其他模块的不当因素可能带来的影响了。

图片咋成了网址？

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